磷酸清洗　　通常用于從系統中除去有機雜質(zhì)?？赡苁怯捎谙礈熳饔?，它似乎比強有機溶劑更好也更快。這一步清洗必須在硝酸鈍化之前完成。硝酸鈍化　　實(shí)際上是作用于不銹鋼表面，在表面上生成均勻的氧化層。這層氧化膜保護不銹鋼免受腐蝕（鹵化物，螯合劑，等等）并且盡量減少浸出的金屬離子進(jìn)入流動(dòng)相。以下應用需要在使用前做磷酸清洗和硝酸鈍化包括：?所有的氨基酸分析系統　　?所有包含電化學(xué)檢測器的系統　　?所有要分析無(wú)機陽(yáng)離子，包括過(guò)渡金屬的系統　　?所有利用柱后添加衍生試劑或絡(luò )合樣品組分的系統以下應用需要在使用前只做磷酸清洗包括：　　?所有常規用途的、可能在低pH環(huán)境下在低紫外檢測波長(cháng)下運行的HPLC系統　　?所有需要高靈敏度性能的梯度紫外檢測系統系統清洗指南注意：在實(shí)行這個(gè)程序時(shí)采用適當的安全防護措施準備工作：　　首先，摘下色譜柱，用兩通或接頭取代色譜柱。在實(shí)行這一清洗步驟時(shí)，如果有可能選擇監測的紫外波長(cháng)為：254nm。通過(guò)軟件或移去電纜的方式取消紫外檢測器的自動(dòng)回零功能。具體步驟：　　1、用甲醇*沖洗系統，以等比例方式通過(guò)泵的所有管路?！　?、用水*沖洗系統，以等比例方式通過(guò)泵的所有管路?！　?、以等比例方式通過(guò)泵的所有管路導入～30%v/v磷酸水溶液。以1mL/min流速洗大約一個(gè)小時(shí)。在沖洗期間活動(dòng)所有的閥，包括：參比閥、進(jìn)樣閥及旁路閥等等?！　?、用水*沖洗所有管路和系統?！　”匾獣r(shí)用6N硝酸（HN03）重復以上步驟。否則，跳到第7步。注意：硝酸是一個(gè)強紫外吸收溶液。除非需要，不要做鈍化程序　　5、以等比例方式通過(guò)泵的所有管路導人6N硝酸水溶液（大約是40%）。以1mL/min流速洗大約一個(gè)小時(shí)?！　?、用水*沖洗系統，仔細檢查是否有任何滲漏，在沖洗期間反復活動(dòng)所有的閥，包括：參比閥、進(jìn)樣閥及旁路閥等等?！　∽⒁猓喝绻阋玫陀?70nm的紫外波長(cháng)作檢測，則需要更大量水的清洗過(guò)程，不斷的換新鮮水并活動(dòng)各個(gè)閥（沖洗進(jìn)樣器，等）以便從系統中除去所有的痕量硝酸根離子。硝酸清洗后經(jīng)常在幾天之內都會(huì )觀(guān)察到在低紫外波長(cháng)下有負的基線(xiàn)漂移。勤換水和有耐心是盡快消除紫外本底的關(guān)鍵?！　?、返回到甲醇洗，然后繼續用實(shí)驗所需的溶劑沖洗?！　?、通過(guò)軟件或接上電纜的方式重新使紫外檢測器的自動(dòng)回零功能恢復。