反相液相色譜可供選擇的固定相種類(lèi)繁多令人眼花繚亂，即使是某一種固定相(例如C18)的可選擇種類(lèi)也是很多的?！　±蠈?shí)說(shuō)，我們的很多方法開(kāi)發(fā)都是在嘗試和錯誤中進(jìn)行，這些都是基于我們喜愛(ài)的供應商提供的成熟的或者新興的固定相。即使是先進(jìn)的含有仔細考量的正交化及電腦優(yōu)先洗脫設計的“篩選"平臺，有時(shí)也不得不采取“色譜的本能"?！　》聪嗌V中的保留是基于被分析物、流動(dòng)相、鍵合相以及鍵合了配體的硅膠表面的活性和其可接觸性之間的平衡。 想要搞清楚影響分離效果的保留機理，就要考慮并明確化學(xué)鍵合相、活性硅膠表面的處理、硅膠表面的可接觸性等因素，這些都將影響色譜柱的原始選擇性及方法開(kāi)發(fā)的優(yōu)化?！　≡诖蠖鄶捣聪喾蛛x中色散作用是起主要作用的，尤其是那些使用未改性的烷基配體(C18、C8、C4)，其保留能力是與被分析物的疏水性成正比的。含有芳香基團或不飽和基團的固定相或被分析物進(jìn)行分析時(shí)，電荷轉移(或π-π)作用是起主要作用的。偶極-氫鍵相互作用對于極性化合物的保留是很重要的，含有“氰基"的固定相會(huì )增強對極性化合物的保留。被分析物的電離部分與硅膠表面之間存在靜電作用力，這是由于硅膠表面有殘留的可離子化的硅醇基?！　‘斍坝性S多色譜柱分類(lèi)系統存在，這些系統都是基于對已知化學(xué)探針物質(zhì)的檢測，從而來(lái)描述固定相的*特性。一個(gè)非常有用的例子就是美國藥典(USP)中的產(chǎn)品質(zhì)量研究數據庫(也就是PQRI系該的*特性。一個(gè)非常有用的例子就是美國藥典(USP)中的產(chǎn)品質(zhì)量研究數據庫(也就是PQRI系該數據庫采用保留(1,2)的疏水減法模型來(lái)描述固定相的疏水性(H)，判斷疏水性類(lèi)似而有不同形狀或流體力學(xué)體積的被分析物的空間結構選擇性參數(S),在pH值為7.0和2.8時(shí)的氫鍵(作為路易斯酸或路易斯堿)和靜電作用參數(C)。pH值為7.0時(shí)硅醇基活性很強，pH為2.8時(shí)具有酸性的硅醇基將會(huì )與極性或可離子化的被分析物發(fā)生作用產(chǎn)生拖尾。*的或正交的固定相一般會(huì )有較大的S、B和C(7.0)值。這些大型的數據庫對于比較固定相的特點(diǎn)是很有用的，“雷達圖"也是另一種比較固定相特點(diǎn)的有用方式。